基因擴增PCR實(shí)驗室設計的核心問(wèn)題是如何避免污染。在實(shí)際工作中,常見(jiàn)的有以下幾種污染類(lèi)型:擴增產(chǎn)物的污染;天然基因組DNA的污染;試劑的污染以及標本間的污染。由于一旦發(fā)生污染,實(shí)驗就須停止,直到找到污染源為止,而且實(shí)驗結果須作廢,需重新進(jìn)行實(shí)驗。所以發(fā)生污染后再?lài)@實(shí)驗室來(lái)尋找污染源不但耗時(shí)而且繁瑣,浪費人力物力。因此要避免污染,首先應是預防,而不是排除。
基因擴增PCR的日常維護保養工作:
1、樣品池的清洗
先打開(kāi)蓋子,然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液體,用棉簽吸干剩余液體,設定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運行,讓殘余液體揮發(fā)去除,一般5~10min即可。
2、熱蓋的清洗
對于熒光定量基因擴增儀,當有熒光污染出現,而且這一污染并非來(lái)自樣品池時(shí),或當有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時(shí),需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔干凈,無(wú)污物阻擋光路。
3、儀器外表面的清洗
清洗JS-G基因擴增儀的外表面可以除去灰塵和油脂,但達不到消毒的效果,選擇沒(méi)有腐蝕性的清洗劑對基因擴增儀的外表面進(jìn)行清洗。
4、更換保險絲
先將基因擴增儀關(guān)機,拔去插頭,打開(kāi)電源插口旁邊的保險盒,換上備用的保險絲,觀(guān)察是否恢復正常。